Made with MAGIX Exemples de tests biologiques disponibles (1) Analyses et mesures de fonctions fondamentales de la cellule : prolifération, apoptose, vieillissement, différenciation, tumorigénicité. - Activité proliférative par établissement d’une courbe de croissance cellulaire par comptage de noyaux sur la base de l’ADN coloré au Hoechst, sur une période de 24 et 48heures. - Identification de points de blocage ou d’activation dans le cycle cellulaire, phases G1, S ou M; Il s’agit de : 1) mesurer la synthèse d’ADN (BrdU) 2) d’évaluer le nombre de figures mitotiques (Histone H3 phosphorylée) en relation avec un blocage en M. - Induction de l’apoptose quantifiée par 1) la fréquence de mort cellulaire mesurée par comptage de noyaux (Hoechst), 2) la mesure de l’activation de la caspase 3. - Induction d’activités kinases détectée par mesure de l’activation de la forme phosphorylée de l’enzyme ; ex : ERK1, SRC, AKT. Des tests de toxicité et stratégies de recherche et d’analyse de bioactivité de molécules. Ils incluent : - la possibilité d’études comparatives sur modèles cellulaires aux normes des banques internationales référentes (normes ISO) : - la recherche d’un effet cytotoxique aspécifique et la mise en évidence d’un effet bioactif , particulièrement un effet sur l’activité proliférative ou la mort cellulaire. - l’identification d’un mécanisme moléculaire (arrêt du cycle cellulaire, induction d’apoptose, blocage d’une voie de signalisation (ex. inhibition de protéines kinases), blocage mitotique (tubuline et fuseau achromatique). Sur demande des utilisateurs, des modèles autres peuvent être introduits dans les tests.  Tests spécifiques de toxicité hépatique (voir Prestations- Expertise) Ils incluent la recherche de 1) marqueurs de toxicité; 2) ’induction d’enzymes du métabolisme de détoxication (CYPs et GSTs); 3) la recherche de métabolites actifs. Ces tests sont disponibles, ils mettent en œuvre des lignées cellulaires différenciées pertinentes (lignée HepaRG) mais aussi de modèles de cultures primaires d’hépatocytes d’origine humaine est aussi envsageable. Certaines voies du métabolisme des lipides au niveau hépatique, peuvent être en outre explorées grâce à la lignée HepaRG. Un test triparamétrique particulièrement adapté à la lignée HepaRG a été développé par la plate-forme. Un test de génotoxicité est à l’étude. Tests d’adhésion, de motilité et de migration Utilisation de l’acquisition d’images en temps réel (”time laps”). Technique du « wound healing » pour l’analyse du pouvoir invasive et de la cicatrisation. Ces tests sont adaptables à différents modèles cellulaires notamment à la peau. Tests biologiques (suite)